体内成瘤性检测用于评价待检细胞在动物体内形成进行性肿瘤的能力。实验中，将从 MCB 或 WCB 复苏并扩增 3–10 代以上的细胞，制备每毫升含 5×10^7 个活细胞、活力≥90% 的悬液作为待检细胞；阳性对照采用已知成瘤性细胞（如 Hela），每毫升含 5×10^6 个活细胞；阴性对照可用人二倍体细胞或 PBS。动物可选 4–7 周龄裸鼠或 3–5 日龄新生小鼠，每组 ≥10 只，皮下或肌内注射待检细胞 0.2 ml（含 10^7 个活细胞），阳性对照 0.2 ml（含 10^6 个活细胞）；弱成瘤性或新建细胞可在新生裸鼠中接种 0.1 ml（含 10^7 个活细胞）。动物至少观察 16 周，前 3–6 周每周 2 次，其后每周 1 次，记录注射部位结节形成及变化。观察期末处死所有动物，对注射部位及主要器官进行肉眼及组织病理学检查。若待检组 ≥2 只动物形成进行性肿瘤且组织学及基因型分析与接种细胞一致，则判定细胞具有成瘤性；未形成进行性肿瘤则判定为无成瘤性；单例形成则需进一步分析。