该方法以细胞培养上清或细胞裂解物为待测样本，分别接种至少三种指示细胞，包括猴源细胞、人二倍体细胞和同种属来源的细胞；对于昆虫细胞，还需增加对虫媒病毒敏感的蚊子细胞（或BHK-21细胞）以及对多种昆虫病毒敏感的果蝇胚胎来源细胞。每种指示细胞至少接种1×10⁷个活细胞或相当量的裂解物，并进行至少28天培养，期间可至少传代一次，传代时间距观察期末不得少于7天。

在观察期内，通过镜检记录细胞形态及病变情况，并在期末取细胞培养物进行血吸附试验（HA），取上清液进行红细胞凝集试验（HI）。试验中使用0.2%～0.5%豚鼠红细胞、鸡红细胞或混合红细胞悬液，分别在2～8℃及20～25℃孵育30分钟后观察红细胞吸附及凝集情况，新鲜红细胞应在2～8℃保存不超过7天，溶液中不含钙、镁离子。

判定标准为：各指示细胞不出现病变，血吸附及红细胞凝集试验均为阴性。试验应设置病毒阳性对照，包括细胞病变阳性对照、血吸附阳性对照和血凝阳性对照。如待测样品对指示细胞存在干扰，应采取措施排除干扰因素。